Elektronenmikroskopielabor
Das Elektronenmikroskopielabor des Zentrums für Anatomie und Zellbiologie bietet ein breites Spektrum an Präparations- und Bildgebungsverfahren zur Untersuchung der Ultrastrukur von Zellen und Geweben.
Die Untersuchung biologischer Proben wird durch die Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) und die TEM-Tomographie realisiert. Je nach Größe und Probentyp können konventionelle, chemische Fixierung, Mikrowellenfixierung und Kryofixierung verwendet werden.
Sowohl interne als auch externe Dienstleistungen stehen auf kooperativer Basis zur Verfügung. Für eine individuelle Projektgestaltung und Informationen zu den Nutzungsentgelten sprechen Sie uns bitte an (Dr. Andy Sombke).
Ausstattung
Analysen der inneren Struktur von Zellen und Geweben können mittels Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) durchgeführt werden, die zweidimensionale Bilder liefert. Dazu sind ultradünne Schnitte von Proben (meist 50 nm) notwendig, in die Elektronen eindringen können. Zusätzlich kann durch schrittweise Rotation (80°) des Probengitters eine 3-dimensionale Bildgebung erreicht werden (sogenannte TEM-Tomographie).
Das Transmissionselektronenmikroskop Tecnai G20 kann Objekte in der Regel bis zu einer 100.000-fachen Vergrößerung (höhere Vergrößerungen abhängig von der Probenqualität) mit einer Beschleunigungsspannung von 20–200 kV sichtbar machen. Für die digitale Bildgebung ist das TEM mit einer 4k-CCD-Kamera ausgestattet.
Unsere Einrichtung nutzt:
- Leica EM AFS1 (Baltec HPM-010) zur Kryofixierung
- Leica ACE 200 zur Karbonbeschichtung
- Pelco BioWave Pro+ Labormikrowelle
- Hochgeschwindigkeitsfräs-System vor der Ultramikrotomie mittels Leica Ultratrim
- Leica Ultracut S und 7 zur semi- und ultradünnen Mikrotomie
- Leica Ultracut 7 mit Leica EM FC7 zur Kryo-Mikrotomie
- 200 kV Tecnai G2 20 (FEI) Transmissionselektronenmikroskop mit TEM-Tomographie-Option (mit einer FEI Eagle 4K CCD-Kamera) zur Bildgebung und -aufnahme
Zu unseren etablierten Protokollen gehören:
- konventionelle chemische Fixierung für Gewebeproben, Organoide, 3D-Zellkulturproben und Zellmonolayer
- Hochdruckgefrieren und Gefrierersatz für eine hochwertige Zellkonservierung
- Negativfärbung zur Visualisierung von z.B. Makromolekülen und Bakterien
- semi- und ultradünne Mikrotomie von in Harz eingebetteten Proben
Service und Kooperationen
Als Service- und Kooperationseinheit bieten wir den gesamten Workflow von der Fixierung und Einbettung über das Schneiden und Kontrastieren bis hin zur Bildaufnahme.
Darüber hinaus sind wir mit Workstations zur Bildanalyse und 3D-Rekonstruktion (Amira, ThermoFisher) ausgestattet.